Tamén estamos a facer experimentos de PCR, por que os resultados sempre son moito peores que outros?

Tamén estamos a facer experimentos de PCR, por que os resultados sempre son moito peores que outros?

No laboratorio, mira a PCR doutras persoas, a eficiencia de amplificación é alta, a tira de electroforese perfecta e mira a súa propia, difícil de facer durante moito tempo, sente que a reacción é moi boa, o resultado dunha proba de falso positivo... Que é o problema?

Creo que moitos dos nosos socios tamén se atoparon con diversos problemas.Cando nos atopamos cunha parede nos experimentos de PCR, analizaremos inconscientemente os factores dentro do sistema de reacción, pero moitas veces ignoramos a importante influencia dos consumibles nos experimentos.

O resultado da PCR é incorrecto, os consumibles de PCR poden ser o motivo esencial.Por unha banda, a micro contaminación de consumibles ou a introdución de inhibidores provocará contaminación experimental;Por outra banda, a selección incorrecta dos consumibles tamén fará que os resultados experimentais se vexan afectados.

O problema vén de novo.Hai moitos tipos de consumibles de PCR, entón como elixir os correctos para facer o experimento máis suave?Cales son os problemas aos que se debe prestar atención?Non te preocupes, hoxeI combinado con moitos anos de experiencia, resolver os problemas comúns de selección de consumibles PCR, espero axudarche.

 

P1: Por que os consumibles de PCR adoitan facerse de material PP?

Huida: Debido a que os materiais de PCR adoitan estar en contacto directo con reactivos ou mostras, os materiais de polipropileno (PP) son bioloxicamente inertes, non se adhiren aos biomoleculares e teñen unha boa tolerancia química e tolerancia á temperatura (pódense autoclapar a 121ºC).° C, tamén pode soportar cambios de temperatura durante o ciclo térmico).

 

P2: Como debo escoller entre diferentes tamaños de tubos/placas de PCR?

HUIDA: Finalidade da selección: seleccionar os produtos axeitados segundo os requisitos experimentais específicos.A maior parte do tamaño do tubo de PCR pode cumprir os requisitos da reacción de PCR.Sobre esta base, recoméndase escoller primeiro o tubo de baixo volume.Debido a que o tubo/placa de reacción de baixo volume ten un pequeno espazo superior, a condutividade térmica é mellorada e a evaporación redúcese.Ao mesmo tempo, é necesario evitar engadir demasiadas ou moi poucas mostras.Demasiada cantidade pode provocar unha diminución da condutividade térmica, verteduras e contaminación cruzada, mentres que unha cantidade insuficiente pode producir perdas por evaporación da mostra.

Especificacións e volumes dos tubos de reacción comúns:

Tubo único/combinado: 0,5 ml, 0,2 ml, 0,15 ml

Placa de 96 pocillos: 0,2 ml, 0,15 ml

Placa de 384 pocillos: 0,04 ml

 

P3: Cando a cantidade de mostra sexa pequena, escollerei un tubo único ou un tubo combinado, pero por que algúns teñen cuberta plana e outros teñen cuberta convexa?

Huida: Cando a cantidade de mostra é pequena, preferirase o tubo único ou o tubo combinado.Non obstante, cando o volume de reacción é grande, o único tubo é dominante e o volume pode alcanzar os 0,5 ml.E cuberta plana e cuberta convexa cada unha ten a vantaxe, específico pode referirse á seguinte información.

Tubo único: 0,2 ml e 0,5 ml;Pode escoller a cantidade de mostra de forma flexible.

Tubo de conexión: 0,2 ml ou 0,15 ml é opcional;Son comúns 8 ou 12 tubos.

Cuberta plana: pode proporcionar unha transmisión precisa de sinal de fluorescencia para qPCR;Fácil de escribir marcas.

Cuberta convexa: contacto coa cuberta quente do instrumento de PCR para reducir a deformación do tubo de reacción causada pola presión;Non obstante, afectará á transmisión do sinal de fluorescencia e non se pode aplicar ao experimento qPCR.

 

P4: Por que algunhas placas de PCR teñen faldas e outras non?

Huida: De feito, o faldón da placa PCR está deseñada para adaptarse mellor ás aplicacións de automatización, proporcionando un soporte estable e resistencia mecánica ao instrumento, así como unha maior estabilidade durante o proceso de pipeteo.

As placas de PCR divídense xeralmente en sen dobladillo, medio dobladillo e dobladillo completo.

SenPlaca: apta para a maioría das máquinas de PCR ou máquinas qPCR, pero non para aplicacións de automatización.A estabilidade non é alta no proceso de pipeteo, polo que debe usarse con soporte de placa.

Placa de bordo de media saia: pódese adaptar á aplicación de etiquetas ou códigos de barras, e á aplicación automática, e ten unha boa estabilidade de pipeteo.

Placa de bordo de saia completa: moi adecuada para aplicacións experimentais automatizadas, tamén se pode adaptar á etiqueta e á aplicación do código de barras.Ten unha boa resistencia mecánica, pódese usar no instrumento de PCR do módulo bulge e ten unha alta estabilidade no proceso de pipeteo.

 

Q5 :Para as placas de PCR, por que as esquinas e as etiquetas non son iguais?

Huida: Depende do efecto do corte da esquina e do marcado.

Corte de cantos: a elección da posición de corte de cantos da placa PCR depende dos requisitos do instrumento axeitado para facilitar o posicionamento.

Identificación: os marcadores alfanuméricos das placas de PCR axudan a identificar os pozos individuais e as localizacións das mostras.Xeralmente para o logotipo dixital en relevo ou o logotipo gravado.Para algunhas aplicacións automatizadas, as placas de reacción impresas e marcadas están mellor seladas.

 

P6: Por que algunhas placas de PCR son convexas mentres que outras son planas?Cal é mellor?

Huida: O que encaixa é mellor.Hai dous tipos de placas de PCR comúns: marxe de poro plano e marxe de poro alta.

Placa de reacción de marxe de burato plano, adecuada para a maioría dos aparellos de PCR.

As placas de reacción con bordos de orificios ascendentes facilitan o selado da membrana e reducen o risco de contaminación cruzada entre as mostras.

 

Huida ten moitos anos de experiencia na produción e procesamento de produtos de PCR e altos estándares da industria.A liña de produtos é rica e pode satisfacer a gran maioría das aplicacións experimentais de PCR.Ven e elixe os produtos axeitados para as túas aplicacións experimentais.

谷歌推广疫情产品PCR


Hora de publicación: 03-06-2021

Envíanos a túa mensaxe:

Escribe aquí a túa mensaxe e envíanolo